Hvordan øger kryostervering chancerne for befrugtning?
Ved naturlig befrugtning blandes hemmeligheden hos de kønne kirtler dels med cellerne i epidermis, hvilket resulterer i en vis ændring i mediumets pH, hvilket fører til ødelæggelsen af lipoproteindækslet af spermatozoer, dvs. til deres aktivering. At være i denne tilstand er levetiden for reproduktive celler alvorligt begrænset, hvilket udelukker deres videre anvendelse til IVF. Derfor anvendes cryopreservation- metoden .
Denne teknik øger sædets holdbarhed signifikant og tillader:
- reducere spermatozoas motoriske aktivitet
- giver dem en yderligere energikilde;
- beskytter kimcellemembranen mod ødelæggelse;
- forhindrer akkumulering af toksiske metaboliske produkter;
- blokerer reproduktionen af mikroorganismer i ejakulatet.
Hvilke medier bruges til at opbevare sæd?
For at gøre det lettere, skal den såkaldte proces til at knuse ejakulatet, der er nødvendig for isolering af kimceller fra den, fortyndes sædcellerne. Særlige reagenser anvendes.
Til dato er det sædvanligt at anvende syntetiske medier til sædopbevaring, der hver især kræver særlige forhold. Typisk består denne form for miljø af flere komponenter, normalt mindst tre. Så i deres struktur er det muligt at allokere sukker, oftest og anvendes glucose og lactose, natriumcitrat.
Hvis vi taler om specifikke kemiske forbindelser, der kan bruges som medier til opbevaring af sæd, kan der blandt disse kaldes Tris-buffer, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Under hvilke forhold opbevares ejakulatet?
Teknologien til indefrysning og opbevaring af sæd kræver tilslutning til et særligt køle regime samt brug af specielle anordninger. I dette tilfælde skal laboratorierummet selv nødvendigvis være udstyret med apparater, som steriliserer luften.
Før ejakulatet opsamles, steriliseres alle nødvendige indretninger til kryopreservering, især alle slags flasker, graduerede cylindre, pipetter, papirfiltre i et specialskab ved en temperatur på 130-150 grader. Inden den direkte prøveudtagningsprocedure placeres de i en speciel termostat, som opretholder en konstant temperatur på 37 grader.
Når sædprøven er fjernet, placeres den i en steril kolbe. Opbevaringstemperaturen i sædcellerne skal være konstant. Køleprocessen udføres i 2 trin.
For at bruge ejakuleret, kryopreserveret tidligere, er fartøjet sammen med det anbragt i varmt vand, hvor langsom optøning finder sted. Derefter fjernes de anvendte kryobeskyttelsesmidler ved gentagen genfældning af sæd på centrifugen. Derefter erstattes sædvæsken selv med et næringsmedium, i hvilket spermatozoa efterfølgende placeres.